ISBN 9783843948166

978-3-8439-4816-6, Reihe Biologie

Johannes Fechner
Analyse der Stabilität des Notch Signaltransduktors CSL

200 Seiten, Dissertation Universität Hohenheim Stuttgart-Hohenheim (2021), Softcover, A5

Zusammenfassung / Abstract

Suppressor of Hairless (Su(H)) ist der Transkriptionsfaktor im Notch Signalweg in Drosophila melanogaster. Durch seine Wirkung als eine Art molekularer Schalter nimmt Su(H) innerhalb des Notch Signalwegs eine zentrale Rolle ein. Gemeinsam mit Hairless (H), dem Hauptrepressor des Notch Signalwegs sowie weiteren Korepressoren, bildet Su(H) den Repressorkomplex aus. Ist der Signalweg aktiv, bildet Su(H) zusammen mit intrazellulärem Notch (ICN) und Mastermind (Mam) sowie weiteren Koaktivatoren den Aktivatorkomplex. Untersuchungen H- bindungsdefekter Su(H) Varianten gaben Hinweise darauf, dass das Su(H) Protein im Aktivator- bzw. Repressorkomplex stabilisiert wird, d.h. als frei vorkommendes Protein einem schnellen Abbau unterliegt. Die Analyse zur Stabilität des Su(H) Proteins wurden in der hier vorliegenden Arbeit vertieft. Die Ergebnisse zeigen, dass Su(H) sowohl in der Fliege, als auch in HeLa Zellen durch Interaktion mit H vor Abbau geschützt wird. Ebenfalls konnte ein schneller Abbau des Su(H) Proteins, mit einer Halbwertszeit von ca. 2h gezeigt werden. Da Su(H) einem proteasomalen Abbau unterliegt sollten ebenfalls Lysine identifiziert werden, die am Abbau des Su(H) Proteins beteiligt sind. Unerwarteterweise zeigten sich Su(H) Varianten, in denen die Lysine K103 und K104 zu Alanin mutiert worden waren, instabiler im Vergleich zum wildtypischen Protein. Dies könnte auf einer Ladungsänderung des Proteins beruhen, da die positiv geladenen Lysine K103 und K104 zu neutralem Alanin verändert wurden und sich benachbart zu zwei negativ geladenen Glutaminsäuren befinden. Diese liegen in räumlicher Nähe einer bekannten Phosphorylierungsstelle in Su(H) (Threonin 426). Die veränderte Ladung könnte demnach wie eine Pseudophosphorylierung wirken, die einen verstärkten Abbau des Su(H) Proteins auslöst. Die in dieser Arbeit gewonnenen Erkenntnisse erweitern damit das Wissen über eine mögliche Regulation des Notch Signalwegs durch Degradation des Transkriptionsfaktors Su(H).